| 產(chǎn)品編號 | S0010 |
| 英文名稱(chēng) | Acridine Orange solution |
| 中文名稱(chēng) | AO染色液(1mg/ml) |
| 別 名 | Acridine Orange staining solution (1mg/ml); AO solution; AO染液(1mg/ml) |
| 保存條件 | 4℃避光保存，有效期12個(gè)月。. |
| 產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介： Acridine Orange (吖啶橙,) 屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。吖啶橙激發(fā)濾光片波長(cháng)488nm。阻斷濾光片波長(cháng)515nm。吖啶橙與細胞中DNA和RNA結合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光（即著(zhù)色特異性）。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細胞膜，使核DNA和RNA染色。因此AO常用于細胞內DNA和RNA進(jìn)行檢測。AO與核酸結合方式主要有：1、插入性結合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結合方式主要為AO與DNA的結合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結合，這種結合方式主要為AO與RNA的結合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結合會(huì )呈桔黃色或桔紅色熒光。因此，吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。 AO染色液(1mg/ml)為儲存液，使用時(shí)應稀釋到合適濃度后使用。AO染色常與EB染色合用雙染，因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。AO染色液工作濃度為8.5ug/ml。 使用說(shuō)明： 1. 收集細胞(采用流式細胞儀檢測時(shí)，應先固定細胞)，用 PBS 清洗細胞 1 次，計數并調節細胞濃度至 106/ml。 2. 取適量的細胞懸液，加入 AcridineOrangeStain(1mg/ml)，使 AO 終濃度為 8.5-10μg/ml，輕輕混勻。 3. 室溫避光染色 15-20min，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細胞儀分析。 4. 熒光顯微鏡下觀(guān)察(激發(fā)濾光片波長(cháng)488nm，阻斷濾光片波長(cháng)515nm)，計數并拍照。 注意事項： 1. Acridine OrangeStain (1mg/ml) 不含破膜劑，較少單獨使用。 2. 吖啶橙染色常與 EB 染色合用，可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 3. 如有低溫離心機進(jìn)行離心效果更佳。 4. 操作過(guò)程中應注意減少試劑暴露于強光下的時(shí)間。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液(C02-04003)。 5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。 |
