新冠疫苗保護性能評估

采用膠體金免疫層析技術(shù)，通過(guò)雙抗原夾心法測試RBD結合抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區，血清會(huì )在毛細作用下向前層析，結合墊上的膠體金會(huì )溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達檢測區后，膠體金標記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線(xiàn)上包被的S-RBD形成復合物，表現為檢測線(xiàn)顯色，血清中的抗體含量與檢測線(xiàn)顯色強度成正相關(guān)。反應結束后，直接肉眼觀(guān)察顯色情況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過(guò)檢測線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)上膠體金顯色強弱，可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測RBD結合抗體

應用場(chǎng)景

血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學(xué)診斷及疫苗臨床效果評價(jià)—抗RBD總抗體檢測。

測試結果

標記: 膠體金標記S-RBD (bs-46003P)和膠體金標記兔IgG (bs-0295P)包被: C線(xiàn)為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線(xiàn)為S-RBD (bs-46003P/bs-46005P)

備注：“+++”表示反應很強；“++”表示反應較強；“+”表示反應較弱；“±”反應很弱；“-”表示無(wú)反應。

采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區，血清會(huì )在毛細作用下向前層析，結合墊上的膠體金會(huì )溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達檢測區后，膠體金標記的S-RBD與檢測線(xiàn)上包被的ACE2結合，并被固定在檢測線(xiàn)上，表現為檢測線(xiàn)顯色，而血清中的中和抗體會(huì )與檢測線(xiàn)上的ACE2競爭結合S-RBD，從而導致固定在檢測線(xiàn)上的S-RBD減少，檢測線(xiàn)顯色下降。反應結束后，直接肉眼觀(guān)察顯色情況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過(guò)檢測線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)上膠體金顯色強弱，可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體

應用場(chǎng)景

疫苗臨床效果評價(jià)、康復者血清中保護性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細胞過(guò)程，通過(guò)阻斷RBD與ACE2的結合間接評價(jià)機體內抗RBD中和性抗體的水平。

測試結果

標記: 膠體金標記RBD (bs-46003P)和膠體金標記兔IgG (bs-0295P)包被: C線(xiàn)為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線(xiàn)為Human ACE2 (bs-46001P/bs-46002P)

由此可見(jiàn)，陰性血清無(wú)中和活性，而陽(yáng)性血清中含有中和性抗體，血清稀釋倍數在1:200時(shí)可完全阻斷RBD與ACE2的結合。

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