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標簽抗體 (Tag Antibody)
標簽抗體是指能夠與重組蛋白上的標簽 (His、GST、FLAG等)特異性結合的抗體，可通過(guò)標簽融合蛋白免疫宿主的方式得到。
標簽抗體 (Tag Antibody)可用于檢測和純化各種商品化表達載體上的標簽序列，籍以分析目的蛋白的表達含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應，這些標簽抗體可以高度特異地結合對應的標簽融合蛋白。
標簽抗體除了識別和純化蛋白以外，還有許多其它的用途，比如免疫印跡、免疫共沉淀、流式細胞、免疫熒光檢測等。標簽抗體已經(jīng)成為開(kāi)展基因蛋白表達、信號轉導和基因功能研究的常用工具，在蛋白質(zhì)相互作用、細胞超微結構和蛋白質(zhì)定位研究中發(fā)揮重要作用。
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常用標簽類(lèi)別
常用標簽包括：Flag、His、Myc、HA、GST、GFP等。
Flag標簽
Flag標簽是由八個(gè)親水氨基酸構成的一段寡肽(DYKDDDDK)。由于Flag標簽系統的純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋白。
His標簽
His標簽由人工合成的組氨酸首尾相連構成，通常由6個(gè)氨基酸(HHHHHH)組成，也有3個(gè)和8個(gè)的情況。另外，也存在一種由19個(gè)組氨酸構成的天然多聚組氨酸標簽(HAT-tag)。由于分子量較小，且較容易分離和純化，是目前使用最廣泛的一種。Myc標簽
Myc標簽(序列為：EQKLISEEDL)可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲(chóng)細胞和哺乳細胞中的表達情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過(guò)偶聯(lián)Myc標簽抗體到二乙烯砜活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì )降低蛋白質(zhì)的活力，因此Myc標簽系統廣泛應用于檢測但很少用于純化。HA標簽
HA融合蛋白也是一種小肽，由9個(gè)氨基酸組成(YPYDVPDYA)，其來(lái)源于流感病毒的紅細胞凝集素表面抗原決定簇。對外源目的蛋白的空間結構影響較小，容易構建成標簽蛋白融合到N端或者C端。易于用抗HA抗體檢測和ELISA檢測。
GST標簽
GST具有解毒作用，可將谷胱甘肽中的硫基轉移至含硝基或鹵化物的復合物中。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過(guò)親和層析得到。GFP標簽
綠色螢光蛋白(Green Fluorescent Protein)，簡(jiǎn)稱(chēng)GFP，是發(fā)光生物體內廣泛存在的一類(lèi)蛋白質(zhì)，不需要激發(fā)即可發(fā)出一定波長(cháng)的熒光。GFP或其突變體EGFP等被廣泛用于基因表達效率的檢測，以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分布。一般來(lái)說(shuō)，GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當的突變體，也可以分析GFP或其適當的突變體融合蛋白的表達、細胞內定位，以及純化、定性或定量分析GFP融合蛋白等。
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